Nokkur ensím sem almennt eru notuð í PCR tilraunum

Pólýmerasa keðjuverkun, skammstafað semPCRá ensku, er sameindalíffræðitækni sem notuð er til að magna upp ákveðin DNA-brot.Það má líta á það sem sérstaka DNA afritun utan líkamans, sem getur aukið mjög lítið magn af DNA til muna.Á meðan á ölluPCRhvarfferli, einn flokkur efna gegnir mikilvægu hlutverki - ensím.

1. Taq DNA

Í tilraunum í árdagaPCR, vísindamenn notuðu Escherichia coli DNA pólýmerasa I, En það er vandamál með þetta ensím: það þarf að fylla á nýtt ensím í hvert skipti sem hringrás er framkvæmd, sem gerir aðgerðarskrefin örlítið flókin og það er erfitt að magna að fullu sjálfkrafa.Þetta vandamál var leyst eftir að vísindamenn einangruðu fyrir slysni Taq DNA pólýmerasa frá Thermus aquaticus árið 1988. Síðan þá hefur sjálfvirk mögnun DNA orðið að veruleika.Uppgötvun þessa ensíms gerir einnigPCRtækni þægileg, hagnýt og alhliða tækni.Sem stendur er Taq DNA pólýmerasi algengasti pólýmerasi í DNA pökkum.

2. PfuDNA

Eins og getið er hér að ofan hefur Taq DNase stóran galla, svo vísindamenn hafa breytt Taq DNA pólýmerasa að vissu marki til að forðast ósértæka mögnun vegna misræmis, sem leiðir til ónákvæmra prófunarniðurstaðna.En breyting á Taq DNA pólýmerasa getur hamlað virkni DNA pólýmerasa við stofuhita.PfuDNA pólýmerasi getur vel bætt upp fyrir ofangreinda ókosti Taq DNA pólýmerasa, þannig að PCR viðbrögðin geta farið fram á eðlilegan hátt og árangurshlutfall markgenamögnunar er hægt að bæta á áhrifaríkan hátt.

3. Reverse Transcriptase

Reverse transcriptasi var uppgötvað árið 1970. Þetta ensím notar RNA sem sniðmát, dNTP sem hvarfefni, fylgir meginreglunni um basapörun og myndar DNA einstreng sem er viðbót við RNA sniðmátið í 5′-3′ stefnuna.Bakrit er fyrst og fremst háð DNA pólýmerasavirkni frá DNA eða RNA sniðmátum og hefur því enga 3′-5′ exonucleasa virkni.Hins vegar hefur það RNase H virkni, sem takmarkar myndun lengd bakrita að vissu marki.Vegna lítillar tryggðar og hitastöðugleika villtra bakrita, breyttu vísindamenn honum einnig.

FyrirPCRtilraunir, helstu rekstrarvörur eru: einstök PCR rör, 4/8 ræma PCR rör, PCR plötur.

hjá LabioPCR rekstrarvörurhafa eftirfarandikostir:

PCR plötur: Breið samhæfni við hitauppstreymi;Mikil birtuskil, auðveld auðkenning;vel flúrljómunarspegilmynd; gottVarmaflutningur;Vottaður DNase, RNase, DNA, PCR hemlar og prófuð pýrógenlaus.

Einstök PCR slöngur: Uppgufunarþolið; gottVarmaflutningur;framúrskarandi sjónræn skýrleiki; Vottaður DNase, RNase, DNA, PCR hemlar og prófuð pýrógenlaus.

4/8 ræmur PCR slöngur: Ofurþunnir veggir; mikil skýrleiki; góð flúrljómun endurspeglun;hægt að nota í lyfjaiðnaði, matvælaiðnaði og sameindalíffræði; hágæða, jómfrúar PP efni; vottað DNasi, RNase, DNA, PCR hemlar og prófað pýrógenfrítt.